【培养基配制使用作业指导书】一、目的

为规范实验室中培养基的配制与使用流程，确保实验结果的准确性与可重复性，特制定本作业指导书。本文件适用于各类微生物培养、细胞培养及相关生物实验中培养基的制备与操作。

二、适用范围

本指导书适用于所有涉及培养基配制与使用的实验人员，包括但不限于微生物学、分子生物学、细胞生物学等相关实验领域。

三、职责

1. 实验技术人员负责按照本指导书进行培养基的配制与使用。

2. 实验负责人应监督并确保操作符合标准流程。

3. 所有使用者需熟悉本指导书内容，并在实际操作中严格遵守。

四、材料与设备准备

1. 基础成分：根据实验需求选择合适的培养基类型（如LB培养基、MS培养基、血琼脂等），并按配方准确称量所需试剂。

2. 水：使用去离子水或蒸馏水，确保水质符合实验要求。

3. 器具：烧杯、量筒、移液管、磁力搅拌器、pH计、高压灭菌锅、玻璃器皿等。

4. 辅助工具：天平、恒温水浴锅、无菌操作台等。

五、配制步骤

1. 计算与称量

根据所选培养基配方，精确计算各组分用量，并使用电子天平准确称取。

2. 溶解与混合

将称好的试剂加入适量水中，搅拌至完全溶解。必要时可加热促进溶解，但应注意避免过热导致成分破坏。

3. 调整pH值

使用pH计测定溶液pH值，根据需要使用稀盐酸或氢氧化钠调节至适宜范围（通常为6.8～7.2）。

4. 定容与混匀

将溶液转移至容量瓶中，加水至刻度线，摇匀使成分均匀分布。

5. 灭菌处理

将配制好的培养基分装至适当容器中，使用高压蒸汽灭菌器（121℃，15-20分钟）进行灭菌处理。

6. 冷却与保存

灭菌后将培养基置于室温下冷却，待温度降至适宜范围（一般不超过50℃）后，可倒入无菌平板或保存于冰箱中备用。

六、使用规范

1. 无菌操作

在使用前，应在超净工作台内进行操作，避免污染。

2. 使用前检查

检查培养基是否变质、颜色异常或有沉淀物，如有问题应及时更换。

3. 使用方法

根据实验目的选择合适的方法进行接种或培养，如涂布法、划线法、液体培养等。

4. 记录与标识

每次使用后应详细记录使用时间、使用人及实验内容，并对剩余培养基进行正确标识和保存。

七、注意事项

1. 配制过程中应佩戴防护手套与护目镜，防止化学物质接触皮肤或眼睛。

2. 不同类型的培养基不可混用，以免影响实验结果。

3. 灭菌后的培养基应尽快使用，避免长时间存放导致质量下降。

4. 实验结束后，应妥善处理废弃培养基，符合实验室废弃物管理规定。

八、附录

- 常见培养基配方表

- pH值校准方法

- 灭菌参数对照表

九、版本控制

| 版本号 | 修订日期 | 修订内容 | 修订人 |

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| V1.0 | 2025-04-05 | 初稿发布 | 张XX|

十、参考文献

1. 《微生物实验技术手册》

2. GB/T 19495-2004 实验室安全规范

3. ISO 14644-1 净化实验室环境标准

本作业指导书旨在提供标准化的操作流程，确保实验过程的安全性与科学性。请所有使用者认真阅读并严格执行。