在生物分子相互作用研究领域，Fortebio Octet 系统凭借其高灵敏度、高通量和操作简便等优势，已成为众多科研人员和制药企业的重要工具。作为基于生物膜干涉技术（BioLayer Interferometry, BLI）的分析平台，Octet 通过实时监测生物分子结合过程中的光学信号变化，提供精确的动力学数据和亲和力信息。

为了帮助用户更好地理解和使用 Octet 系统，我们整理了本篇《Fortebio Octet 生物膜干涉技术（BLI）常见问题解答 - 第二版》，涵盖系统操作、数据分析、实验设计等方面的问题，旨在为用户提供全面的技术支持与参考。

一、关于 Octet 系统的基本知识

Q1：什么是 BLI 技术？它与 SPR 技术有何不同？

BLI（生物膜干涉技术）是一种基于光干涉原理的检测方法，通过测量生物分子与传感器表面之间的光波相位变化来反映分子间的结合情况。相比传统的 SPR（表面等离子共振）技术，BLI 具有更低的样品消耗、更简单的操作流程以及对非标记样品的兼容性更强。

Q2：Octet 系统可以用于哪些类型的实验？

Octet 可广泛应用于以下实验类型：

- 分子间相互作用动力学（如 Kd、kon、koff）

- 抗体-抗原结合

- 酶-底物反应

- 蛋白质-蛋白质相互作用

- 核酸杂交分析

- 小分子药物筛选

二、实验操作相关问题

Q3：如何选择合适的传感器？

Octet 提供多种类型的传感器，包括针对蛋白、抗体、核酸、小分子等不同目标的专用探针。选择时应根据实验目的和样品特性进行匹配，例如：

- SA（链霉亲和素）传感器：适用于带生物素的分子。

- Protein A/G 传感器：适用于抗体类分子。

- NHS 传感器：适用于直接固定蛋白或肽段。

Q4：Octet 实验中如何优化结合时间？

结合时间的选择取决于目标分子的结合速率。通常建议从 50 秒开始尝试，并根据实际信号变化进行调整。若信号上升缓慢，可适当延长；若出现饱和，则需缩短时间。

三、数据分析与结果解读

Q5：如何判断结合是否达到平衡？

在 BLI 实验中，当结合曲线趋于平缓、无明显上升或下降趋势时，可认为已达到平衡状态。通常可以通过观察响应值的变化率（ΔR/Δt）来判断，当其接近于零时，即表示平衡完成。

Q6：Octet 数据如何进行动力学拟合？

Octet 软件（如 Octet Data Analysis）支持多种动力学模型，包括 1:1 模型、双位点模型等。建议先用 1:1 模型进行初步拟合，若结果不理想再考虑其他模型。同时，确保实验条件一致，避免背景干扰。

四、常见故障与解决办法

Q7：为什么检测信号不稳定？

信号波动可能由以下原因引起：

- 检测池内存在气泡

- 传感器未正确安装或老化

- 样品浓度过高或含有杂质

- 温度或湿度环境不稳定

建议检查仪器状态、更换传感器并优化样品制备流程。

Q8：如何处理传感器污染问题？

如果发现传感器表面出现异常信号或响应值下降，可能是由于污染物附着。此时应使用配套的清洗溶液进行彻底清洗，并按照操作手册执行标准清洁程序。

五、进阶应用与优化建议

Q9：如何提高低浓度样品的检测灵敏度？

对于低浓度样品，建议采用以下策略：

- 增加结合时间和解离时间

- 使用更高灵敏度的传感器（如 HA 或 SA 类）

- 优化样品稀释梯度

- 在软件中启用“动态基线校正”功能

Q10：Octet 是否适合高通量筛选？

是的，Octet 系统支持多通道并行检测，非常适合高通量筛选实验。用户可通过自动化平台（如 Octet HTX）实现批量样本分析，显著提升实验效率。

结语

随着生物分子相互作用研究的不断深入，Fortebio Octet 系统因其出色的性能和灵活性，已经成为生命科学研究的重要工具。希望通过本篇《Fortebio Octet 生物膜干涉技术（BLI）常见问题解答 - 第二版》，能够帮助用户更加高效、准确地使用 Octet 平台，推动科研工作的顺利开展。

如需进一步技术支持或定制化解决方案，请联系官方技术团队。